Cum se efectuează diluții seriale

Conţinut

• etape
• Metoda 1 Efectuați o diluare simplă
• Metoda 2 Calculați factorul de diluare și concentrația finală

În chimie, o diluare constă în reducerea concentrației unei soluții date. O diluție în serie este pur și simplu o diluare repetată a unei soluții originale pentru a amplifica rapid factorul de diluare. Acest tip de diluare este adesea efectuat în timpul experimentelor care necesită soluții extrem de diluate și o precizie ridicată, cum ar fi cele care implică curbe de concentrație pe o scară de jurnal sau cele care permit calcularea densității bacteriilor din anumite medii. Ele sunt foarte des efectuate în biochimie, microbiologie, farmacologie sau chimie.

etape

Metoda 1 Efectuați o diluare simplă

1. 
   

   
   Determinați lichidul (sau diluantul) care se diluează corect. Alegerea diluantului este foarte importantă și depinde de soluția pe care doriți să o diluați. Diluvantul este adesea apă distilată, dar nu este sistematic. Astfel, cu o soluție care conține bacterii sau celule, se utilizează în schimb un mediu de cultură. Pentru diluarea în serie, același diluant este utilizat în toate tuburile.
   • Dacă nu sunteți sigur de ce diluant să utilizați, obțineți ajutor de la o persoană competentă sau căutați pe Internet ce trebuie să facă oamenii pentru o experiență similară.

2. 
   

   
   Pregătiți mai multe epruvete care conțin 9 ml de lichid de diluare. Aceste epruvete vor fi utilizate pentru a face diluții succesive. Principiul este simplu, veți lua un eșantion al soluției de pornire și îl transferați în următorul tub, apoi veți lua un eșantion din acest tub pentru a-l pune în următorul etc.
   • Înainte de a începe diluțiile, se recomandă identificarea în prealabil a epruvetelor pentru a evita confuziile ulterioare.
   • În fiecare tub, veți avea o concentrație cu zece mai mică decât în ​​precedent. Primul tub va conține o soluție diluată în al zecelea, al doilea, a suta, a treia, a mii și așa mai departe. Determinați în avans numărul de diluări pentru a evita să faceți mai multe tuburi decât este necesar și să diluați inutil diluantul.

3. 
   

   
   
   
   Pregătiți o eprubetă cu soluția mamă. Puneți cel puțin 2 ml. Cantitatea minimă de soluție stoc pentru diluarea în serie este de un mililitru. Se lasă 2 ml pentru o posibilă a doua diluție. Acest tub de soluție mamă, îl poți marca "SM".
   • Înainte de a începe o diluție în serie, amestecați bine soluția de pornire.

4. 
   

   
   Faceți prima diluție. Pipetați 1 ml de soluție stoc în eprubetă etichetat "SM" și transferați această cantitate în eprubetă etichetată. 1/10 care conține deja 9 ml lichid de diluare. Se amestecă pentru a obține o soluție omogenă. În acest tub, există acum 10 ml soluție: 1 ml soluție stoc și 9 ml lichid de diluare. Această soluție nouă este de zece ori mai puțin concentrată decât cea anterioară.

5. 
   

   
   
   
   Efectuați a doua diluție. În a doua diluție în serie, veți trage 1 ml soluție de tub etichetată 1/10 și o vei turna în tub 1/100 care conține deja 9 ml lichid de diluare. Tubul 1/10 va fi bine amestecat înainte de prelevare. După efectuarea transferului, amestecați bine tubul 1/100. Soluția din tubul marcat 1/10 este de 10 ori mai concentrat decât cel al tubului etichetat 1/100.

6. 
   

   
   Repetați această manipulare dacă este necesar. Această procedură poate fi repetată de câte ori doriți, până când se obține diluția dorită. Pentru un experiment care implică curbe de concentrare, puteți obține astfel o serie de soluții cu diluții la unitate, a zecea (1/10), a suta (1/100) sau a milesima (1/1000).

Metoda 2 Calculați factorul de diluare și concentrația finală

1. 
   

   
   Calculați raport diluția finală după diluarea în serie. Raportul total de diluție obținut prin înmulțirea factorului de diluție de unul singur de câte ori există diluții. Din punct de vedere matematic, formula este următoarea: D_T = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_ncu D_T reprezentând factorul total de diluare și D_n, raportul dintre diluare.
   • Deci, să presupunem că efectuați o diluție de 1/10 a unui lichid de 4 ori la rând. În formulă, înlocuiți factorul de diluare cu valoarea sa: D_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
   • Factorul final de diluare al celui de-al patrulea tub din diluția dvs. serială este de 1/10 000. Concentrația soluției din ultimul tub este acum de 10 000 de ori mai mică decât cea a soluției originale.

2. 
   

   
   Determinați concentrația unei soluții după diluare. Pentru a găsi concentrația finală a unei soluții după diluarea în serie, trebuie să cunoașteți concentrația de pornire. Formula este atunci: C_final = C_inițială/ Acu C_final reprezentând concentrația terminală a soluției diluate, C_inițială, concentrația soluției stoc și D, raportul diluției determinat în avans.
   • Deci, dacă diluați o soluție de celule cu o concentrație de 1.000.000 de celule pe ml și raportul de diluție a fost stabilit la 1.000, care va fi concentrația finală a probei dvs. diluate?
   • Utilizați formula:
     • C_final = C_inițială/ A
     • C_final = 1 000 000/1 000
     • C_final = 1000 celule / ml

3. 
   

   
   Atenție la unitățile utilizate. Când efectuați calculele, verificați întotdeauna dacă utilizați aceleași unități. Astfel, dacă porniți de la o concentrație de celule pe ml, rezultatul final va fi și în celule per ml. Dacă concentrația dvs. inițială este în părți pe milion (ppm), concentrația finală va fi în părți pe milion.